-
Cilt ve vücut bakımı için Aromaterapi Saf Doğal Okaliptüs yaprağı esansiyel yağı
Çıkarma veya İşleme Yöntemi: buharla damıtılmış
Damıtma Çıkarma kısmı: yaprak
Ülkenin kökeni: Çin
Uygulama: Yaygın/aromaterapi/masaj
Raf ömrü: 3 yıl
Özelleştirilmiş hizmet: özel etiket ve kutu veya isteğinize göre
Sertifikasyon: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
Okaliptüs yağı, mukusla reaksiyona girerek onu gevşetir ve nefes darlığı ve diğer solunum yolu sorunlarından anında rahatlama sağlar. Böcek kovucu olarak kullanılabilecek kadar güçlüdür. Aromaterapide kullanıldığında zihin berraklığı sağlar. Terapötik faydaları, antimikrobiyal, antibakteriyel, antiseptik, antispazmodik ve antiviral özelliklerinden kaynaklanır. Okaliptüs yağını çeşitli cilt ve sağlık sorunlarına karşı kullanabilirsiniz. İçeriğinde sineol olarak da bilinen okaliptol bulunur. Bu bileşik genel sağlığınızı ve refahınızı destekleyecektir.
-
Aromaterapi cilt bakımı için doğal saf organik lavanta esansiyel yağı
Çıkarma veya İşleme Yöntemi: Buharla damıtılmış
Damıtma Çıkarma kısmı: Çiçek
Ülkenin kökeni: Çin
Uygulama: Yaygın/aromaterapi/masaj
Raf ömrü: 3 yıl
Özelleştirilmiş hizmet: özel etiket ve kutu veya isteğinize göre
Sertifikasyon: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
-
Cilt Bakımı İçin %100 Saf Doğal Organik Manolya Officmalis Cortex Yağı Esansiyel Yağı
Hou Po'nun kokusu ilk başta acımsı ve keskin bir keskinliğe sahipken, daha sonra yavaş yavaş derin, şuruplu bir tatlılık ve sıcaklıkla açılıyor.
Hou Po, acı sıcaklığının Qi'yi ve kuru nemi azaltmada güçlü bir etkiye sahip olduğu Toprak ve Metal elementlerine yakınlığı nedeniyle, Çin tıbbında sindirim sistemindeki durgunluk ve birikmeyi, ayrıca akciğerleri tıkayan balgamdan kaynaklanan öksürük ve hırıltıyı gidermek için kullanılır.
Magnolia Officinials, Sichuan, Hubei ve Çin'in diğer eyaletlerinin dağ ve vadilerine özgü yaprak döken bir ağaçtır. Geleneksel Çin tıbbında kullanılan yoğun aromatik kabuk, gövde, dal ve köklerden sıyrılarak Nisan-Haziran ayları arasında toplanır. Kalın, pürüzsüz ve yağ bakımından zengin kabuğun iç kısmı morumsu bir renge ve kristal parlaklığa sahiptir.
Uygulayıcılar, birikimleri parçalamayı amaçlayan karışımlarda üst nota tamamlayıcısı olarak Hou Po'yu Qing Pi esansiyel yağıyla birleştirmeyi düşünebilirler.
-
OEM Özel Paket Doğal Makrosefal Rhizoma yağı
Etkili bir kemoterapi ilacı olan 5-florourasil (5-FU), gastrointestinal sistem, baş, boyun, göğüs ve yumurtalıklardaki kötü huylu tümörlerin tedavisinde yaygın olarak kullanılmaktadır. 5-FU, klinikte kolorektal kanser için birinci basamak ilaçtır. 5-FU'nun etki mekanizması, tümör hücrelerinde urasil nükleik asidinin timin nükleik asidine dönüşümünü engellemek, ardından sitotoksik etkisini elde etmek için DNA ve RNA sentezini ve onarımını etkilemektir (Afzal vd., 2009; Ducreux vd., 2015; Longley vd., 2003). Bununla birlikte, 5-FU aynı zamanda birçok hastayı etkileyen en yaygın yan etkilerden biri olan kemoterapi kaynaklı diyareye (CID) de neden olur (Filho vd., 2016). 5-FU ile tedavi edilen hastalarda ishal görülme sıklığı %50-80'lere kadar ulaşmış olup, bu durum kemoterapinin seyrini ve etkinliğini ciddi şekilde etkilemiştir (Iacovelli ve ark., 2014; Rosenoff ve ark., 2006). Sonuç olarak, 5-FU kaynaklı kronik karaciğer hastalığı için etkili bir tedavi bulmak büyük önem taşımaktadır.
Günümüzde, ilaç dışı müdahaleler ve ilaç müdahaleleri CID'nin klinik tedavisine ithal edilmiştir. İlaç dışı müdahaleler makul bir diyet ve tuz, şeker ve diğer besin takviyelerini içerir. Loperamid ve oktreotid gibi ilaçlar CID'nin anti-ishal tedavisinde yaygın olarak kullanılmaktadır (Benson vd., 2004). Ek olarak, çeşitli ülkelerde kendi benzersiz tedavileriyle CID'yi tedavi etmek için etnomedikaller de benimsenmektedir. Geleneksel Çin tıbbı (GÇT), Çin, Japonya ve Kore dahil olmak üzere Doğu Asya ülkelerinde 2000 yıldan fazla süredir uygulanan tipik bir etnomedikaldir (Qi vd., 2010). GÇT, kemoterapi ilaçlarının Qi tüketimini, dalak yetmezliğini, mide uyumsuzluğunu ve endofitik nemi tetikleyeceğini ve bunun da bağırsakların iletim tipi işlev bozukluğuna yol açacağını savunur. GÇT teorisinde, CID'nin tedavi stratejisi esas olarak Qi takviyesine ve dalağı güçlendirmeye dayalı olmalıdır (Wang vd., 1994).
Kurutulmuş kökleriAtractylodes macrocephalaKoidz. (AM) vePanax ginsengCA Mey. (PG), Çin Tıbbı'nda Qi takviyesi ve dalağı güçlendirme etkileriyle aynı olan tipik bitkisel ilaçlardır (Li ve ark., 2014). AM ve PG, genellikle ishal tedavisinde Qi takviyesi ve dalağı güçlendirme etkileriyle bitki çifti (Çin bitkisel uyumluluğunun en basit biçimi) olarak kullanılır. Örneğin, AM ve PG, Shen Ling Bai Zhu San, Si Jun Zi Tang gibi klasik ishal önleyici formüllerde belgelenmiştir.Taiping Huimin Heji Ju Fang(Song hanedanı, Çin) ve Bu Zhong Yi Qi TangPi Wei Lun(Yuan Hanedanlığı, Çin) (Şekil 1). Birkaç önceki çalışma, üç formülün de CID'yi hafifletme yeteneğine sahip olduğunu bildirmiştir (Bai vd., 2017; Chen vd., 2019; Gou vd., 2016). Ayrıca, önceki çalışmamız, yalnızca AM ve PG içeren Shenzhu Kapsülünün ishal, kolit (xiexie sendromu) ve diğer gastrointestinal hastalıkların tedavisinde potansiyel etkilere sahip olduğunu göstermiştir (Feng vd., 2018). Ancak, hiçbir çalışma AM ve PG'nin CID tedavisinde, ister kombinasyon halinde ister tek başına olsun, etkisini ve mekanizmasını tartışmamıştır.
Artık bağırsak mikrobiyotasının TCM'nin terapötik mekanizmasını anlamada potansiyel bir faktör olduğu düşünülmektedir (Feng vd., 2019). Modern çalışmalar bağırsak mikrobiyotasının bağırsak homeostazını korumada önemli bir rol oynadığını göstermektedir. Sağlıklı bağırsak mikrobiyotası bağırsak mukozal korumasına, metabolizmaya, bağışıklık homeostazına ve yanıtına ve patojen baskılanmasına katkıda bulunur (Thursby ve Juge, 2017; Pickard vd., 2017). Bozuk bağırsak mikrobiyotası insan vücudunun fizyolojik ve bağışıklık fonksiyonlarını doğrudan veya dolaylı olarak bozarak ishal gibi yan reaksiyonlara neden olur (Patel vd., 2016; Zhao ve Shen, 2010). Araştırmalar 5-FU'nun ishalli farelerde bağırsak mikrobiyotasının yapısını önemli ölçüde değiştirdiğini göstermiştir (Li vd., 2017). Bu nedenle, AM ve PM'nin 5-FU kaynaklı ishal üzerindeki etkileri bağırsak mikrobiyotası aracılığıyla gerçekleşmiş olabilir. Ancak AM ve PG'nin tek başına veya kombinasyon halinde bağırsak mikrobiyotasını düzenleyerek 5-FU kaynaklı ishalin önüne geçip geçemeyeceği henüz bilinmemektedir.
AM ve PG'nin ishal karşıtı etkilerini ve altta yatan mekanizmalarını araştırmak amacıyla, farelerde ishal modelini simüle etmek için 5-FU kullandık. Burada, tek ve kombine (AP) uygulamasının potansiyel etkilerine odaklandık.Atractylodes macrocephalauçucu yağ (AMO) vePanax ginsengAM ve PG'den ekstrakte edilen aktif bileşenler olan toplam saponinlerin (PGS), 5-FU kemoterapisi sonrası ishal, bağırsak patolojisi ve mikrobiyal yapı üzerine etkileri.
-
Cilt Bakımı İçin %100 Saf Doğal Eucommiae Foliuml Yağı Esansiyel Yağı
Eucommia ulmoides(EU) (Çince dilinde genellikle “Du Zhong” olarak adlandırılır) Eucommiaceae ailesine aittir, Orta Çin'e özgü küçük bir ağaç cinsidir [1]. Bu bitki, tıbbi önemi nedeniyle Çin'de büyük ölçekte yetiştirilmektedir. AB'den lignanlar, iridoidler, fenolikler, steroidler ve diğer bileşikleri içeren yaklaşık 112 bileşik izole edilmiştir. Bu bitkinin tamamlayıcı bitki formülü (lezzetli çay gibi) bazı tıbbi özellikler göstermiştir. AB'nin yaprağı, korteks, çiçek ve meyve ile ilgili olarak daha yüksek aktiviteye sahiptir [2,3]. AB'nin yapraklarının kemik gücünü ve vücut kaslarını artırdığı bildirilmiştir [4], böylece insanlarda uzun ömürlülüğe ve doğurganlığın artmasına yol açar [5]. AB yapraklarından yapılan lezzetli çay formülünün yağlılığı azalttığı ve enerji metabolizmasını artırdığı bildirilmiştir. Flavonoid bileşiklerinin (rutin, klorojenik asit, ferulik asit ve kafeik asit gibi) AB yapraklarında antioksidan aktivite gösterdiği bildirilmiştir [6].
AB'nin fitokimyasal özellikleri hakkında yeterli literatür bulunmasına rağmen, AB'nin kabuk, tohum, gövde ve yapraklarından elde edilen çeşitli bileşiklerin farmakolojik özellikleri üzerine çok az çalışma bulunmaktadır. Bu derleme makalesi, AB'nin çeşitli kısımlarından (kabuk, tohum, gövde ve yaprak) elde edilen farklı bileşikler ve bu bileşiklerin bilimsel kanıtlara dayalı olarak sağlık geliştirici özelliklerindeki olası kullanımları hakkında ayrıntılı bilgi sunacak ve böylece AB'nin uygulanması için bir referans materyali sağlayacaktır.
-
Pure Natural Houttuynia cordata oil Houttuynia Cordata Oil Lchthammolum Oil
Gelişmekte olan ülkelerin çoğunda nüfusun %70-95'i birincil sağlık bakımı için geleneksel ilaçlara güveniyor ve bunların %85'i aktif madde olarak bitkileri veya bunların özlerini kullanıyor.1Bitkilerden yeni biyolojik olarak aktif bileşiklerin araştırılması genellikle yerel uygulayıcılardan elde edilen belirli etnik ve halk bilgilerine dayanır ve hala ilaç keşfi için önemli bir kaynak olarak kabul edilir. Hindistan'da yaklaşık 2000 ilaç bitki kökenlidir.2] Tıbbi bitkilerin kullanımına yönelik yaygın ilgi göz önüne alındığında, bu inceleme,Houttuynia cordataThunb., literatürde yer alan botanik, ticari, etnofarmakolojik, fitokimyasal ve farmakolojik çalışmalara ilişkin güncel bilgileri sunmaktadır.H. cordataThunb. ailesine aittirSaururaceaeve yaygın olarak Çin kertenkele kuyruğu olarak bilinir. Stolonlu köksapı ve iki farklı kemotipi olan çok yıllık bir bitkidir.3,4] Türün Çin kemotipi, Nisan'dan Eylül'e kadar Hindistan'ın Kuzeydoğusunda vahşi ve yarı vahşi koşullarda bulunur.5,6,7]H. cordataHindistan'da, özellikle Assam'ın Brahmaputra vadisinde bulunur ve Assam'ın çeşitli kabileleri tarafından bitkisel olarak ve geleneksel olarak çeşitli tıbbi amaçlarla kullanılır.
-
%100 Saf Arctium lappa yağı Üreticisi – Kalite Güvence Sertifikalı Doğal Kireç Arctium lappa yağı
Sağlık Faydaları
Dulavratotu kökü sıklıkla yenir, ancak kurutulup çay olarak da tüketilebilir. İnülin kaynağı olarak iyi bir iş görür.prebiyotikSindirime yardımcı olan ve bağırsak sağlığını iyileştiren lif. Ayrıca bu kök, flavonoidler (bitki besinleri) içerir.fitokimyasallarve sağlık açısından faydalı olduğu bilinen antioksidanlar.
Dulavratotu kökü ayrıca şu gibi başka faydalar da sağlayabilir:
Kronik İnflamasyonu Azaltın Dulavratotu kökü, hücrelerinizi korumaya yardımcı olabilecek kuersetin, fenolik asitler ve luteolin gibi bir dizi antioksidan içerir.serbest radikallerBu antioksidanlar vücuttaki iltihabı azaltmaya yardımcı olur.
Sağlık Riskleri
Dulavratotu kökü, çay olarak tüketilebilir veya içilebilir. Ancak bu bitki, zehirli olan belladonna patlıcangiller familyasına ait bitkilere çok benzemektedir. Dulavratotu kökünü yalnızca güvenilir satıcılardan satın almanız ve kendi başınıza toplamaktan kaçınmanız önerilir. Ayrıca, çocuklar veya hamile kadınlar üzerindeki etkileri hakkında çok az bilgi bulunmaktadır. Dulavratotu kökünü çocuklarda veya hamileyseniz kullanmadan önce doktorunuza danışın.
Dulavratotu kökü kullanıyorsanız göz önünde bulundurmanız gereken diğer olası sağlık riskleri şunlardır:
Artan Dehidratasyon
Dulavratotu kökü, susuzluğa yol açabilen doğal bir idrar söktürücü gibi davranır. Su hapları veya diğer idrar söktürücüler kullanıyorsanız, dulavratotu kökü kullanmamalısınız. Bu ilaçları kullanıyorsanız, susuzluğa yol açabilecek diğer ilaçlar, bitkiler ve içeriklere dikkat etmeniz önemlidir.
Alerjik Reaksiyon
Papatya, ambrosia veya krizantem gibi bitkilere karşı hassasiyetiniz varsa veya geçmişte alerjik reaksiyon gösterdiyseniz, dulavratotu köküne karşı da alerjik reaksiyon gösterme riskiniz artar.
-
Toptan toplu fiyat %100 Saf AsariRadix Et Rhizoma yağı Relax Aromaterapi Okaliptüs globulus
Hayvan ve in vitro çalışmalar, sassafras ve bileşenlerinin potansiyel antifungal, anti-inflamatuar ve kardiyovasküler etkilerini araştırmıştır. Ancak klinik çalışmalar yetersizdir ve sassafras kullanımının güvenli olmadığı düşünülmektedir. Sassafras kök kabuğu ve yağının ana bileşeni olan safrol, ABD Gıda ve İlaç Dairesi (FDA) tarafından, tatlandırıcı veya koku verici olarak kullanımı da dahil olmak üzere yasaklanmıştır ve potansiyel olarak kanserojen olduğu için dahili veya harici olarak kullanılmamalıdır. Safrol, sokak adları "ecstasy" veya "Molly" olarak da bilinen 3,4-metilen dioksimetamfetaminin (MDMA) yasadışı üretiminde kullanılmıştır ve safrol ve sassafras yağının satışı ABD Uyuşturucuyla Mücadele Dairesi tarafından izlenmektedir.
-
Toptan toplu fiyat %100 Saf Stellariae Radix esansiyel yağı (yeni) Rahatlatıcı Aromaterapi Okaliptüs globulus
Çin Farmakopesi (2020 baskısı), YCH'nin metanol özütünün %20,0'den az olmaması gerektiğini şart koşmaktadır [2], başka hiçbir kalite değerlendirme göstergesi belirtilmemiştir. Bu çalışmanın sonuçları, hem yabani hem de kültür örneklerinin metanol özütlerinin içeriğinin farmakope standardını karşıladığını ve aralarında önemli bir fark olmadığını göstermektedir. Dolayısıyla, bu endekse göre yabani ve kültür örnekleri arasında belirgin bir kalite farkı bulunmamaktadır. Ancak, yabani örneklerdeki toplam sterol ve toplam flavonoid içerikleri, kültür örneklerine göre önemli ölçüde daha yüksekti. Daha ileri metabolomik analizler, yabani ve kültür örnekleri arasında bol miktarda metabolit çeşitliliği olduğunu ortaya koymuştur. Ayrıca, 97 önemli ölçüde farklı metabolit taranmış olup bunlarEk Tablo S2Bu önemli ölçüde farklı metabolitler arasında, aktif bileşenler olduğu bildirilen β-sitosterol (ID: M397T42) ve kuersetin türevleri (M447T204_2) bulunmaktadır. Daha önce bildirilmemiş trigonellin (M138T291_2), betain (M118T277_2), fustin (M269T36), rotenon (M241T189), arktiin (M557T165) ve loganik asit (M399T284_2) gibi bileşenler de farklı metabolitler arasında yer almaktadır. Bu bileşenler antioksidan, anti-inflamatuar, serbest radikalleri temizleme, kanser karşıtı ve ateroskleroz tedavisinde çeşitli roller oynar ve bu nedenle YCH'de olası yeni aktif bileşenler oluşturabilirler. Aktif bileşenlerin içeriği, tıbbi malzemelerin etkinliğini ve kalitesini belirler [7]. Özetle, tek YCH kalite değerlendirme endeksi olarak metanol özütünün bazı sınırlamaları vardır ve daha spesifik kalite belirteçlerinin daha fazla araştırılması gerekmektedir. Doğal ve kültüre alınmış YCH arasında toplam steroller, toplam flavonoidler ve diğer birçok farklı metabolitin içeriğinde önemli farklılıklar vardı; bu nedenle, aralarında potansiyel olarak bazı kalite farklılıkları mevcuttu. Aynı zamanda, YCH'de yeni keşfedilen potansiyel aktif bileşenler, YCH'nin işlevsel temelinin incelenmesi ve YCH kaynaklarının daha da geliştirilmesi için önemli bir referans değeri taşıyabilir.
Çin bitkisel ilaçlarının mükemmel kalitede üretilmesi için orijinal tıbbi malzemelerin önemi uzun zamandır belirli menşe bölgesinde bilinmektedir [8]. Yüksek kalite, gerçek tıbbi malzemelerin olmazsa olmaz bir özelliğidir ve habitat, bu tür malzemelerin kalitesini etkileyen önemli bir faktördür. YCH ilaç olarak kullanılmaya başladığından beri, uzun süre yabani YCH'nin hakimiyeti altında kalmıştır. YCH'nin 1980'lerde Ningxia'ya başarıyla getirilmesi ve evcilleştirilmesinin ardından, Yinchaihu tıbbi malzemelerinin kaynağı yavaş yavaş yabani YCH'den kültüre alınmış YCH'ye kaymıştır. YCH kaynakları üzerine daha önce yapılan bir araştırmaya göre [9] ve araştırma grubumuzun saha araştırmasına göre, ekili ve yabani tıbbi materyallerin dağılım alanlarında önemli farklılıklar bulunmaktadır. Yabani YCH, esas olarak İç Moğolistan'ın kurak bölgesine ve Orta Ningxia'ya komşu olan Shaanxi Eyaleti'nin Ningxia Hui Özerk Bölgesi'nde dağılım göstermektedir. Özellikle bu bölgelerdeki çöl bozkırları, YCH büyümesi için en uygun yaşam alanıdır. Buna karşılık, ekili YCH, esas olarak yabani dağılım alanının güneyinde, Çin'in en büyük yetiştirme ve üretim üssü haline gelen Tongxin İlçesi (Ekili I) ve çevresi ile daha güneyde bulunan ve ekili YCH için bir diğer üretim alanı olan Pengyang İlçesi (Ekili II) gibi bölgelere dağılmıştır. Dahası, yukarıdaki iki ekili alanın yaşam alanları çöl bozkırı değildir. Bu nedenle, üretim biçimine ek olarak, yabani ve ekili YCH'nin yaşam alanlarında da önemli farklılıklar bulunmaktadır. Yaşam alanı, bitkisel tıbbi materyallerin kalitesini etkileyen önemli bir faktördür. Farklı habitatlar bitkilerde sekonder metabolitlerin oluşumunu ve birikimini etkileyerek tıbbi ürünlerin kalitesini etkileyecektir [10,11]. Bu nedenle, bu çalışmada bulduğumuz toplam flavonoid ve toplam sterol içerikleri ile 53 metabolitin ekspresyonundaki anlamlı farklılıklar, arazi yönetimi ve habitat farklılıklarından kaynaklanıyor olabilir.Çevrenin tıbbi malzemelerin kalitesini etkilemesinin başlıca yollarından biri, kaynak bitkilere stres uygulamasıdır. Orta düzeydeki çevresel stres, ikincil metabolitlerin birikimini teşvik etme eğilimindedir [12,13]. Büyüme/farklılaşma dengesi hipotezi, besinler yeterli miktarda olduğunda bitkilerin öncelikli olarak büyüdüğünü, besinler eksik olduğunda ise bitkilerin öncelikli olarak farklılaştığını ve daha fazla ikincil metabolit ürettiğini belirtir [14]. Su eksikliğinden kaynaklanan kuraklık stresi, kurak alanlardaki bitkilerin karşılaştığı temel çevresel strestir. Bu çalışmada, ekili YCH'nin su durumu daha bol olup, yıllık yağış seviyeleri yabani YCH'den önemli ölçüde daha yüksektir (Ekili I için su temini Yabani'nin yaklaşık 2 katıydı; Ekili II Yabani'nin yaklaşık 3,5 katıydı). Ayrıca, yabani ortamdaki toprak kumlu topraktır, ancak tarım arazisindeki toprak killi topraktır. Killi toprakla karşılaştırıldığında, kumlu toprağın su tutma kapasitesi düşüktür ve kuraklık stresini ağırlaştırma olasılığı daha yüksektir. Aynı zamanda, yetiştirme süreci genellikle sulama ile birlikte yapıldığından kuraklık stresi derecesi düşüktü. Yabani YCH sert doğal kurak yaşam alanlarında yetişir ve bu nedenle daha ciddi kuraklık stresi yaşayabilir.Ozmoregülasyon, bitkilerin kuraklık stresiyle başa çıkmak için kullandıkları önemli bir fizyolojik mekanizmadır ve alkaloidler, yüksek bitkilerde önemli ozmotik düzenleyicilerdir [15]. Betainler, suda çözünür alkaloid kuaterner amonyum bileşikleridir ve ozmoprotektan görevi görebilirler. Kuraklık stresi, hücrelerin ozmotik potansiyelini azaltabilirken, ozmoprotektanlar biyolojik makromoleküllerin yapısını ve bütünlüğünü korur ve sürdürür ve kuraklık stresinin bitkilere verdiği hasarı etkili bir şekilde hafifletir [16]. Örneğin, kuraklık stresi altında, şeker pancarı ve Lycium barbarum'un betain içeriği önemli ölçüde arttı [17,18]. Trigonellin, hücre büyümesinin bir düzenleyicisidir ve kuraklık stresi altında bitki hücre döngüsünün uzunluğunu uzatabilir, hücre büyümesini engelleyebilir ve hücre hacminin küçülmesine yol açabilir. Hücredeki çözünen madde konsantrasyonundaki göreceli artış, bitkinin ozmotik düzenlemeye ulaşmasını ve kuraklık stresine direnme yeteneğini geliştirmesini sağlar [19] JIA X [20] kuraklık stresindeki artışla birlikte Astragalus membranaceus'un (geleneksel Çin tıbbının bir kaynağı) ozmotik potansiyeli düzenleyen ve kuraklık stresine karşı koyma yeteneğini geliştiren daha fazla trigonellin ürettiğini buldu. Flavonoidlerin ayrıca bitkinin kuraklık stresine karşı direncinde önemli bir rol oynadığı gösterildi [21,22]. Çok sayıda çalışma, orta düzeyde kuraklık stresinin flavonoid birikimine katkıda bulunduğunu doğrulamıştır. Lang Duo-Yong ve ark. [23] kuraklık stresinin YCH üzerindeki etkilerini, tarlada su tutma kapasitesini kontrol ederek karşılaştırdılar. Kuraklık stresinin kök büyümesini belirli bir ölçüde engellediği, ancak orta ve şiddetli kuraklık stresinde (%40 tarla su tutma kapasitesi), YCH'deki toplam flavonoid içeriğinin arttığı bulundu. Bu arada, kuraklık stresi altında fitosteroller hücre zarı akışkanlığını ve geçirgenliğini düzenleme, su kaybını engelleme ve stres direncini artırma işlevi görebilir [24,25]. Bu nedenle, yabani YCH'de toplam flavonoidler, toplam steroller, betain, trigonellin ve diğer sekonder metabolitlerin artan birikimi, yüksek yoğunluklu kuraklık stresiyle ilişkili olabilir.Bu çalışmada, yabani ve kültüre alınmış YCH arasında önemli ölçüde farklı olduğu tespit edilen metabolitler üzerinde KEGG yolu zenginleştirme analizi gerçekleştirilmiştir. Zenginleştirilmiş metabolitler arasında askorbat ve aldarat metabolizması, aminoasil-tRNA biyosentezi, histidin metabolizması ve beta-alanin metabolizması yollarında yer alanlar yer almaktadır. Bu metabolik yollar, bitki stres direnci mekanizmalarıyla yakından ilişkilidir. Bunlar arasında askorbat metabolizması, bitki antioksidan üretimi, karbon ve azot metabolizması, stres direnci ve diğer fizyolojik işlevlerde önemli bir rol oynar [26]; aminoasil-tRNA biyosentezi, protein oluşumu için önemli bir yoldur [27,28], strese dayanıklı proteinlerin sentezinde rol oynar. Hem histidin hem de β-alanin yolları, bitkinin çevresel strese karşı toleransını artırabilir [29,30]. Bu durum ayrıca yabani ve kültüre alınmış YCH arasındaki metabolit farklılıklarının stres direnci süreçleriyle yakından ilişkili olduğunu göstermektedir.Toprak, tıbbi bitkilerin büyümesi ve gelişmesi için gerekli olan temel maddedir. Topraktaki azot (N), fosfor (P) ve potasyum (K), bitkilerin büyümesi ve gelişmesi için önemli besin elementleridir. Toprak organik maddesi ayrıca N, P, K, Zn, Ca, Mg ve tıbbi bitkiler için gerekli diğer makro elementleri ve eser elementleri içerir. Aşırı veya eksik besin maddeleri veya dengesiz besin oranları, tıbbi maddelerin büyümesini, gelişimini ve kalitesini etkiler ve farklı bitkilerin farklı besin gereksinimleri vardır [31,32,33]. Örneğin, düşük bir N stresi, Isatis indigotica'da alkaloid sentezini desteklemiş ve Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge ve Dichondra repens Forst gibi bitkilerde flavonoid birikimine faydalı olmuştur. Buna karşılık, çok fazla N, Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis ve Ginkgo biloba gibi türlerde flavonoid birikimini engellemiş ve tıbbi malzemelerin kalitesini etkilemiştir [34]. P gübresinin uygulanması, Ural meyan kökündeki glisirizik asit ve dihidroaseton içeriğini artırmada etkiliydi [35]. Uygulama miktarı 0,12 kg m−2'yi aştığında, Tussilago farfara'daki toplam flavonoid içeriği azaldı [36]. P gübresinin uygulanmasının geleneksel Çin tıbbı rhizoma polygonati'deki polisakkarit içeriği üzerinde olumsuz bir etkisi oldu [37], ancak bir K gübresi saponin içeriğini artırmada etkiliydi [38]. 450 kg·hm−2 K gübrenin uygulanması, iki yaşındaki Panax notoginseng'in büyümesi ve saponin birikimi için en iyisiydi [39]. N:P:K = 2:2:1 oranında, hidrotermal ekstrakt, harpagid ve harpagosidin toplam miktarları en yüksekti [40]. Yüksek N, P ve K oranı, Pogostemon cablin'in büyümesini teşvik etmede ve uçucu yağ içeriğini artırmada faydalı olmuştur. Düşük N, P ve K oranı, Pogostemon cablin gövde yaprağı yağının ana etkili bileşenlerinin içeriğini artırmıştır [41]. YCH, çorak toprağa dayanıklı bir bitkidir ve N, P ve K gibi besin maddelerine özel gereksinimleri olabilir. Bu çalışmada, yetiştirilen YCH ile karşılaştırıldığında, yabani YCH bitkilerinin toprağı nispeten çoraktı: toprağın organik madde, toplam N, toplam P ve toplam K içerikleri, yetiştirilen bitkilerin sırasıyla yaklaşık 1/10'u, 1/2'si, 1/3'ü ve 1/3'ü kadardı. Bu nedenle, toprak besin maddelerindeki farklılıklar, yetiştirilen ve yabani YCH'de tespit edilen metabolitler arasındaki farklılıkların bir başka nedeni olabilir. Weibao Ma ve ark.42] belirli miktarda N ve P gübresi uygulamasının tohum verimini ve kalitesini önemli ölçüde artırdığını tespit etmiştir. Ancak, besin elementlerinin YCH kalitesi üzerindeki etkisi net değildir ve tıbbi malzemelerin kalitesini artırmak için gübreleme önlemlerinin daha fazla araştırılması gerekmektedir.Çin bitkisel ilaçları “Uygun yaşam alanları verimi artırır, olumsuz yaşam alanları ise kaliteyi artırır” özelliğine sahiptir [43]. Yabani YCH'den kültüre alınmış YCH'ye kademeli geçiş sürecinde, bitkilerin yaşam alanı kurak ve çorak çöl bozkırlarından, daha bol suya sahip verimli tarım arazilerine dönüştü. Kültüre alınmış YCH'nin yaşam alanı daha üstündür ve verimi daha yüksektir, bu da pazar talebini karşılamaya yardımcı olur. Ancak bu üstün yaşam alanı, YCH metabolitlerinde önemli değişikliklere yol açmıştır; bunun YCH kalitesini iyileştirmeye yardımcı olup olmadığı ve bilim temelli yetiştirme önlemleriyle yüksek kaliteli YCH üretiminin nasıl sağlanacağı daha fazla araştırma gerektirecektir.Simülasyonlu habitat ekimi, bitkilerin belirli çevresel streslere uzun vadeli adaptasyonuna ilişkin bilgiye dayalı olarak, yabani tıbbi bitkilerin habitatını ve çevre koşullarını simüle etme yöntemidir [43]. Özellikle otantik tıbbi malzeme kaynağı olarak kullanılan bitkilerin orijinal yaşam alanları olmak üzere, yabani bitkileri etkileyen çeşitli çevresel faktörleri simüle ederek, yaklaşım, Çin tıbbi bitkilerinin büyümesini ve ikincil metabolizmasını dengelemek için bilimsel tasarım ve yenilikçi insan müdahalesini kullanır [43]. Yöntemler, yüksek kaliteli tıbbi malzemelerin geliştirilmesi için en uygun düzenlemeleri sağlamayı amaçlamaktadır. Simüle edilmiş habitat yetiştiriciliği, farmakodinamik temel, kalite belirteçleri ve çevresel faktörlere yanıt mekanizmaları henüz net olmasa bile, YCH'nin yüksek kaliteli üretimi için etkili bir yol sağlamalıdır. Bu doğrultuda, YCH yetiştiriciliği ve üretiminde bilimsel tasarım ve saha yönetimi önlemlerinin, kurak, çorak ve kumlu toprak koşulları gibi yabani YCH'nin çevresel özellikleri dikkate alınarak yürütülmesini öneriyoruz. Aynı zamanda, araştırmacıların YCH'nin fonksiyonel malzeme temeli ve kalite belirteçleri hakkında daha derinlemesine araştırmalar yapmaları da umulmaktadır. Bu çalışmalar, YCH için daha etkili değerlendirme kriterleri sağlayabilir ve sektörün yüksek kaliteli üretimini ve sürdürülebilir gelişimini destekleyebilir. -
Bitkisel Fructus Amomi yağı Doğal masaj difüzörleri 1kg Toplu Amomum villosum Esansiyel yağı
Zingiberaceae ailesi, zengin uçucu yağlar ve üye türlerinin aromatikliği nedeniyle allelopatik araştırmalarda giderek daha fazla ilgi görmektedir. Daha önceki araştırmalar, Curcuma zedoaria (zedoary) bitkisinden elde edilen kimyasalların [40], Alpinia zerumbet (Pers.) BLBurtt & RMSm. [41] ve Zingiber officinale Rosc. [42] Zencefil ailesinden olan bitkilerin mısır, marul ve domatesin tohum çimlenmesi ve fide büyümesi üzerinde allelopatik etkileri vardır. Mevcut çalışmamız, A. villosum'un (Zingiberaceae ailesinin bir üyesi) gövdelerinden, yapraklarından ve genç meyvelerinden elde edilen uçucu maddelerin allelopatik aktivitesi üzerine ilk rapordur. Gövde, yaprak ve genç meyvelerin yağ verimi sırasıyla %0,15, %0,40 ve %0,50 olup, meyvelerin gövde ve yapraklardan daha fazla miktarda uçucu yağ ürettiğini göstermektedir. Gövdelerden elde edilen uçucu yağların ana bileşenleri β-pinen, β-phellandren ve α-pinen olup, bu, yaprak yağının ana kimyasalları olan β-pinen ve α-pinenin (monoterpen hidrokarbonlar) modeline benzer bir desene sahipti. Diğer yandan, genç meyvelerdeki yağ bornil asetat ve kafur (oksijenli monoterpenler) açısından zengindi. Sonuçlar, Do N Dai'nin bulgularıyla desteklenmiştir [30,32] ve Hui Ao [31] A. villosum'un farklı organlarından elde edilen yağları tespit eden.
Bu ana bileşiklerin diğer türlerde bitki büyümesini inhibe edici aktiviteleri hakkında çeşitli raporlar bulunmaktadır. Shalinder Kaur, okaliptüsün α-pineninin 1,0 μL konsantrasyonda Amaranthus viridis L.'nin kök uzunluğunu ve sürgün yüksekliğini belirgin şekilde baskıladığını bulmuştur [43] ve başka bir çalışma, α-pinenin erken kök büyümesini engellediğini ve reaktif oksijen türlerinin üretimini artırarak kök dokusunda oksidatif hasara neden olduğunu göstermiştir [44]. Bazı raporlar, β-pinenin, membran bütünlüğünü bozarak doz bağımlı bir tepki yoluyla test yabani otlarının çimlenmesini ve fide büyümesini engellediğini ileri sürmüştür [45], bitki biyokimyasını değiştirerek ve peroksidazlar ile polifenol oksidazların aktivitelerini artırarak [46]. β-Phellandrene, 600 ppm konsantrasyonda Vigna unguiculata (L.) Walp'ın çimlenmesi ve büyümesi üzerinde maksimum inhibisyon gösterdi [47], oysa 250 mg/m3 konsantrasyonda kafur, Lepidium sativum L.'nin kök ve sürgün büyümesini baskıladı.48]. Ancak, bornil asetatın allelopatik etkisini bildiren araştırmalar yetersizdir. Çalışmamızda, β-pinen, bornil asetat ve kafurun kök uzunluğu üzerindeki allelopatik etkileri, α-pinen hariç, uçucu yağlara kıyasla daha zayıftı. Buna karşılık, α-pinen açısından zengin yaprak yağı, A. villosum'un gövde ve meyvelerinden elde edilen ilgili uçucu yağlardan daha fitotoksikti. Her iki bulgu da α-pinenin bu tür için allelopatide önemli bir kimyasal olabileceğini göstermektedir. Aynı zamanda, sonuçlar meyve yağında bol miktarda bulunmayan bazı bileşiklerin fitotoksik etkinin oluşumuna katkıda bulunabileceğini de ima etmektedir; bu bulgunun gelecekte daha fazla araştırmaya ihtiyacı vardır.Normal koşullar altında, allelokimyasalların allelopatik etkisi türe özgüdür. Jiang ve arkadaşları, Artemisia sieversiana tarafından üretilen uçucu yağın, Medicago sativa L., Poa annua L. ve Pennisetum alopecuroides (L.) Spreng'den ziyade Amaranthus retroflexus L. üzerinde daha güçlü bir etki uyguladığını bulmuşlardır.49]. Başka bir çalışmada, Lavandula angustifolia Mill.'in uçucu yağı, farklı bitki türleri üzerinde farklı derecelerde fitotoksik etkiler üretti. Lolium multiflorum Lam. en hassas alıcı tür oldu, hipokotil ve kökçük büyümesi sırasıyla 1 μL/mL yağ dozunda %87,8 ve %76,7 oranında engellendi, ancak salatalık fidelerinin hipokotil büyümesi neredeyse hiç etkilenmedi [20]. Sonuçlarımız ayrıca L. sativa ve L. perenne arasında A. villosum uçucu maddelerine karşı duyarlılık açısından bir fark olduğunu göstermiştir.Aynı türün uçucu bileşikleri ve uçucu yağları, büyüme koşulları, bitki kısımları ve tespit yöntemleri nedeniyle niceliksel ve/veya niteliksel olarak değişiklik gösterebilir. Örneğin, bir rapor, Sambucus nigra yapraklarından salınan uçucu bileşiklerin başlıca bileşiklerinin piranoid (%10,3) ve β-karyofilen (%6,6) olduğunu, yapraklardan elde edilen yağlarda ise benzaldehit (%17,8), α-bulnesen (%16,6) ve tetrakosan (%11,5) bulunduğunu göstermiştir [50]. Çalışmamızda, taze bitki materyallerinden salınan uçucu bileşiklerin, test bitkileri üzerinde ekstrakte edilen uçucu yağlardan daha güçlü allelopatik etkilere sahip olduğu ve tepkilerdeki farklılıkların, iki preparatta bulunan allelokimyasallardaki farklılıklarla yakından ilişkili olduğu görülmüştür. Uçucu bileşikler ve yağlar arasındaki kesin farkların, sonraki deneylerde daha ayrıntılı olarak araştırılması gerekmektedir.Uçucu yağların eklendiği toprak örneklerindeki mikrobiyal çeşitlilik ve mikrobiyal topluluk yapısındaki farklılıklar, mikroorganizmalar arasındaki rekabetin yanı sıra herhangi bir toksik etki ve uçucu yağların topraktaki süresiyle de ilişkiliydi. Vokou ve Liotiri [51] Ekili toprağa (150 g) dört uçucu yağın (0,1 mL) ayrı ayrı uygulanmasının, yağların kimyasal bileşimleri farklı olsa bile toprak örneklerinin solunumunu aktive ettiğini, bitkisel yağların toprak mikroorganizmaları tarafından karbon ve enerji kaynağı olarak kullanıldığını gösterdiğini buldu. Mevcut çalışmadan elde edilen veriler, A. villosum bitkisinin tamamından elde edilen yağların, yağ ilavesinden sonraki 14. günde toprak mantarı türlerinin sayısındaki belirgin artışa katkıda bulunduğunu doğruladı ve bu da yağın daha fazla toprak mantarı için karbon kaynağı sağlayabileceğini gösterdi. Başka bir çalışma bir bulgu bildirdi: Toprak mikroorganizmaları, Thymbra capitata L. (Cav) yağı ilavesiyle oluşan geçici bir değişim periyodundan sonra ilk işlevlerini ve biyokütlelerini geri kazandılar, ancak en yüksek dozdaki yağ (gram toprak başına 0,93 µL yağ), toprak mikroorganizmalarının ilk işlevlerini geri kazanmalarına izin vermedi [52]. Mevcut çalışmada, farklı günler ve konsantrasyonlarla muamele edildikten sonra toprağın mikrobiyolojik analizine dayanarak, toprak bakteri topluluğunun daha fazla gün sonra iyileşeceğini tahmin ettik. Buna karşılık, mantar mikrobiyotası orijinal durumuna geri dönemez. Aşağıdaki sonuçlar bu hipotezi doğrulamaktadır: Yağın yüksek konsantrasyonunun toprak mantar mikrobiyomunun bileşimi üzerindeki belirgin etkisi, temel koordinat analizi (PCoA) ile ortaya çıkarılmıştır ve ısı haritası sunumları, 3,0 mg/mL yağ (yani gram toprak başına 0,375 mg yağ) ile muamele edilen toprağın mantar topluluğu bileşiminin cins düzeyinde diğer işlemlerden önemli ölçüde farklı olduğunu bir kez daha doğrulamıştır. Şu anda, monoterpen hidrokarbonların veya oksijenli monoterpenlerin eklenmesinin toprak mikrobiyal çeşitliliği ve topluluk yapısı üzerindeki etkileri hakkındaki araştırmalar hala azdır. Birkaç çalışma, α-pinenin düşük nem içeriğinde toprak mikrobiyal aktivitesini ve Methylophilaceae'nin (bir grup metilotrof, Proteobacteria) göreceli bolluğunu artırdığını ve daha kuru topraklarda karbon kaynağı olarak önemli bir rol oynadığını bildirmiştir [53]. Benzer şekilde, A. villosum'un tüm bitkisinin uçucu yağı, %15,03 α-pinen içerir (Ek Tablo S1), 1,5 mg/mL ve 3,0 mg/mL'de Proteobacteria'nın göreceli bolluğunu açıkça artırdı, bu da α-pinenin toprak mikroorganizmaları için karbon kaynaklarından biri olarak hareket edebileceğini düşündürdü.A. villosum'un farklı organları tarafından üretilen uçucu bileşikler, L. sativa ve L. perenne üzerinde çeşitli derecelerde allelopatik etkilere sahipti ve bu, A. villosum bitki parçalarının içerdiği kimyasal bileşenlerle yakından ilişkiliydi. Uçucu yağın kimyasal bileşimi doğrulanmış olsa da, A. villosum tarafından oda sıcaklığında salınan uçucu bileşikler bilinmemektedir ve bu konuda daha fazla araştırma gerekmektedir. Ayrıca, farklı allelokimyasallar arasındaki sinerjik etki de dikkate değerdir. Toprak mikroorganizmaları açısından, uçucu yağın toprak mikroorganizmaları üzerindeki etkisini kapsamlı bir şekilde araştırmak için daha derinlemesine araştırmalar yürütmemiz gerekmektedir: uçucu yağın işlem süresini uzatmak ve farklı günlerde topraktaki uçucu yağın kimyasal bileşimindeki değişimleri ayırt etmek. -
Mum ve sabun yapımında saf Artemisia capillaris yağı toptan difüzör esansiyel yağı kamışlı brülör difüzörleri için yeni
Kemirgen model tasarımı
Hayvanlar rastgele her biri on beş fareden oluşan beş gruba ayrıldı. Kontrol grubu ve model grubu farelerine gavaj uygulandı.susam yağı6 gün boyunca. Pozitif kontrol grubu farelerine 6 gün boyunca bifendat tabletler (BT, 10 mg/kg) gavaj uygulandı. Deney gruplarına 6 gün boyunca susam yağında çözündürülmüş 100 mg/kg ve 50 mg/kg AEO uygulandı. 6. günde, kontrol grubuna susam yağı uygulandı ve diğer tüm gruplara susam yağında tek doz %0,2 CCL4 (10 ml/kg) uygulandı.intraperitoneal enjeksiyonDaha sonra fareler susuz aç bırakıldı ve retrobulber damarlardan kan örnekleri toplandı; toplanan kan 3000 x 1000 devirde santrifüj edildi.g10 dakika boyunca serumun ayrılması için bekletin.Servikal çıkıkKan alındıktan hemen sonra gerçekleştirildi ve karaciğer örnekleri derhal çıkarıldı. Karaciğer örneğinin bir kısmı analize kadar hemen -20 °C'de saklandı ve diğer kısmı çıkarılıp %10'luk bir çözeltide fiksasyona tabi tutuldu.formalinçözüm; kalan dokular histopatolojik analiz için -80 °C'de saklandı (Wang ve diğerleri, 2008,Hsu ve diğerleri, 2009,Nie ve diğerleri, 2015).
Serumdaki biyokimyasal parametrelerin ölçümü
Karaciğer hasarı, tahmin edilerek değerlendirildienzimatik aktivitelerSerum ALT ve AST'nin, kitlerin talimatlarına uygun olarak ilgili ticari kitler kullanılarak ölçülmesi (Nanjing, Jiangsu Eyaleti, Çin). Enzimatik aktiviteler litre başına birim (U/l) olarak ifade edildi.
MDA, SOD, GSH ve GSH-P ölçümüxkaraciğer homojenatlarında
Karaciğer dokuları, 1:9 oranında (a/h, karaciğer:salin) soğuk fizyolojik tuzlu su ile homojenize edildi. Homojenatlar santrifüj edildi (2500 ×g(10 dakika boyunca) sonraki belirlemeler için üst sıvıları toplamak için. Karaciğer hasarı, MDA ve GSH düzeylerinin yanı sıra SOD ve GSH-P'nin hepatik ölçümlerine göre değerlendirildi.xTüm bu aktiviteler, kit üzerindeki talimatlara göre belirlendi (Nanjing, Jiangsu Eyaleti, Çin). MDA ve GSH sonuçları, mg protein başına nmol (nmol/mg protein) olarak ifade edildi ve SOD ve GSH-P aktivitelerixmg protein başına U (U/mg protein) olarak ifade edildi.
Histopatolojik analiz
Taze elde edilen karaciğerin bazı kısımları %10'luk tamponlu bir çözeltide sabitlendi.paraformaldehitfosfat çözeltisi. Numune daha sonra parafine gömüldü, 3-5 μm'lik kesitlere kesildi ve boyandı.hematoksilinVeeozin(H&E) standart bir prosedüre göre ve son olarak analiz edildiışık mikroskobu(Tian ve diğerleri, 2012).
İstatistiksel analiz
Sonuçlar ortalama ± standart sapma (SD) olarak ifade edildi. Sonuçlar SPSS Statistics, sürüm 19.0 istatistik programı kullanılarak analiz edildi. Veriler varyans analizine (ANOVA,p< 0,05) ardından Dunnett testi ve Dunnett T3 testi uygulanarak çeşitli deney gruplarının değerleri arasındaki istatistiksel olarak anlamlı farklar belirlendi. Anlamlı bir fark,p< 0,05.
Sonuçlar ve tartışma
AEO'nun bileşenleri
GC/MS analizi sonucunda AEO'nun 10 ila 35 dakika arasında elüe edilen 25 bileşen içerdiği ve uçucu yağın %84'ünü oluşturan 21 bileşenin tanımlandığı tespit edildi (Tablo 1). İçerisinde bulunan uçucu yağmonoterpenoidler(%80,9), seskiterpenoidler (%9,5), doymuş dallanmamış hidrokarbonlar (%4,86) ve çeşitli asetilen (%4,86). Diğer çalışmalarla karşılaştırıldığında (Guo ve diğerleri, 2004), AEO'da bol miktarda monoterpenoid (%80,90) bulduk. Sonuçlar, AEO'nun en bol bileşeninin β-sitronellol (%16,23) olduğunu gösterdi. AEO'nun diğer önemli bileşenleri arasında 1,8-sineol (%13,9) bulunur.kafur(%12,59),linalool(%11,33), α-pinen (%7,21), β-pinen (%3,99),timol(%3,22) vemirsen(%2,02). Kimyasal bileşimdeki değişim, bitkinin maruz kaldığı çevre koşullarıyla (örneğin mineral su, güneş ışığı, gelişme aşaması vb.) ilişkili olabilir.beslenme.
-
Mum ve sabun yapımında saf Saposhnikovia divaricata yağı toptan difüzör esansiyel yağı kamış brülör difüzörleri için yeni
2.1. SDE'nin hazırlanması
SD rizomları, Hanherb Co.'dan (Guri, Kore) kurutulmuş ot olarak satın alındı. Bitki materyalleri, Kore Doğu Tıbbı Enstitüsü'nden (KIOM) Dr. Go-Ya Choi tarafından taksonomik olarak doğrulandı. Bir çek örneği (numara 2014 SDE-6), Kore Standart Bitki Kaynakları Herbaryumu'na bırakıldı. Kurutulmuş SD rizomları (320 g), %70 etanol ile iki kez ekstrakte edildi (2 saat geri akışla) ve ekstrakt daha sonra düşük basınç altında yoğunlaştırıldı. Kaynatılan kısım filtrelendi, liyofilize edildi ve 4°C'de saklandı. Ham başlangıç materyallerinden elde edilen kurutulmuş ekstrakt verimi %48,13 (a/a) idi.
2.2. Kantitatif Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi (HPLC) Analizi
Kromatografik analiz, bir HPLC sistemi (Waters Co., Milford, MA, ABD) ve bir fotodiyot dizisi dedektörü ile gerçekleştirildi. SDE'nin HPLC analizi için, birincilO-glukozilsimifugin standardı Kore Geleneksel Tıp Endüstrisi Tanıtım Enstitüsü'nden (Gyeongsan, Kore) satın alındı vesn-O-glukozilhamaudol ve 4′-O-β-D-glukozil-5-O-metilvisamminol laboratuvarımızda izole edildi ve öncelikli olarak NMR ve MS ile spektral analizlerle tanımlandı.
SDE örnekleri (0,1 mg) %70 etanolde (10 mL) çözüldü. Kromatografik ayırma, XSelect HSS T3 C18 kolonu (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, ABD). Hareketli faz, 1,0 mL/dak akış hızında asetonitril (A) ve su içinde %0,1 asetik asitten (B) oluşuyordu. Çok adımlı bir gradyan programı şu şekilde kullanıldı: %5 A (0 dk), %5-20 A (0-10 dk), %20 A (10-23 dk) ve %20-65 A (23-40 dk). Algılama dalga boyu 210-400 nm'de tarandı ve 254 nm'de kaydedildi. Enjeksiyon hacmi 10,0μL. Üç kromonun belirlenmesi için standart çözeltiler 7,781 mg/mL'lik (prim-O-glukozilsimifugin), 31.125 mg/mL (4′-O-β-D-glukozil-5-O-metilvisamminol) ve 31,125 mg/mL (sn-O-glukozilhamaudol) metanolde karıştırılarak 4°C'de saklandı.
2.3. Anti-inflamatuar Aktivitenin DeğerlendirilmesiIn vitro
2.3.1. Hücre Kültürü ve Numune İşlemi
RAW 264.7 hücreleri, Amerikan Tip Kültür Koleksiyonu'ndan (ATCC, Manassas, VA, ABD) elde edildi ve %1 antibiyotik ve %5,5 FBS içeren DMEM besiyerinde büyütüldü. Hücreler, 37°C'de %5 CO2 içeren nemli bir atmosferde inkübe edildi. Hücreleri uyarmak için besiyeri, taze DMEM besiyeri ve 1μg/mL, SDE varlığında veya yokluğunda eklendi (200 veya 400μg/mL) ilave 24 saat boyunca bekletilir.
2.3.2. Nitrik Oksit (NO), Prostaglandin E2 (PGE2), Tümör Nekroz Faktörünün Belirlenmesiα(TNF-α), ve İnterlökin-6 (IL-6) Üretimi
Hücreler SDE ile muamele edildi ve 24 saat boyunca LPS ile uyarıldı. NO üretimi, önceki bir çalışmaya göre Griess reaktifi kullanılarak nitrit ölçülerek analiz edildi [12]. İnflamatuar sitokinler PGE2, TNF-'nin salgılanmasıαve IL-6, üretici talimatlarına göre bir ELISA kiti (R&D sistemleri) kullanılarak belirlendi. SDE'nin NO ve sitokin üretimi üzerindeki etkileri, Wallac EnVision kullanılarak 540 nm veya 450 nm'de belirlendi.™mikro plaka okuyucu (PerkinElmer).
2.4. Antiosteoartrit Aktivitesinin DeğerlendirilmesiCanlıda
2.4.1. Hayvanlar
Erkek Sprague-Dawley sıçanları (7 haftalık) Samtako Inc. (Osan, Kore) firmasından satın alındı ve 12 saatlik ışık/karanlık döngüsüne sahip kontrollü koşullar altında barındırıldı.°C ve% nem. Sıçanlara laboratuvar diyeti ve su sağlandıisteğe bağlıTüm deneysel prosedürler Ulusal Sağlık Enstitüleri (NIH) yönergelerine uygun olarak gerçekleştirildi ve Daejeon Üniversitesi (Daejeon, Kore Cumhuriyeti) Hayvan Bakımı ve Kullanım Komitesi tarafından onaylandı.
2.4.2. Sıçanlarda MIA ile OA İndüksiyonu
Hayvanlar rastgele seçildi ve çalışmanın başlatılmasından önce tedavi gruplarına atandı (grup başına). MIA çözeltisi (3 mg/50μ%0,9'luk salin (L) doğrudan ketamin ve ksilazin karışımıyla oluşturulan anestezi altında sağ dizin eklem içi boşluğuna enjekte edildi. Sıçanlar rastgele dört gruba ayrıldı: (1) MIA enjeksiyonu yapılmayan salin grubu, (2) MIA enjeksiyonu yapılan MIA grubu, (3) MIA enjeksiyonu yapılan SDE ile tedavi edilen grup (200 mg/kg) ve (4) MIA enjeksiyonu yapılan indometazin (IM) ile tedavi edilen grup (2 mg/kg). Sıçanlara MIA enjeksiyonundan 1 hafta önce 4 hafta boyunca SDE ve IM oral yoldan uygulandı. Bu çalışmada kullanılan SDE ve IM dozajı, önceki çalışmalarda kullanılan dozajlara dayanıyordu [10,13,14].
2.4.3. Arka Pençe Ağırlık Taşıma Dağılımının Ölçümleri
OA indüksiyonundan sonra, arka ayakların ağırlık taşıma kapasitesindeki orijinal denge bozuldu. Ağırlık taşıma toleransındaki değişiklikleri değerlendirmek için bir inkapasitans test cihazı (Linton Instrumentation, Norfolk, Birleşik Krallık) kullanıldı. Sıçanlar dikkatlice ölçüm odasına yerleştirildi. Arka ayak tarafından uygulanan ağırlık taşıma kuvveti 3 saniyelik bir süre boyunca ortalaması alındı. Ağırlık dağılım oranı şu denklemle hesaplandı: [sağ arka ayak ağırlığı/(sağ arka ayak ağırlığı + sol arka ayak ağırlığı)] × 100 [15].
2.4.4. Serum Sitokin Düzeylerinin Ölçümleri
Kan örnekleri 4°C'de 10 dakika boyunca 1.500 g'de santrifüj edildi; ardından serum toplandı ve kullanılıncaya kadar -70°C'de saklandı. IL-1 düzeyleriβ, IL-6, TNF-αve serumdaki PGE2 düzeyleri, üretici talimatlarına göre R&D Systems (Minneapolis, MN, ABD) firmasının ELISA kitleri kullanılarak ölçüldü.
2.4.5. Gerçek Zamanlı Kantitatif RT-PCR Analizi
Diz eklemi dokusundan TRI reaktifi® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, ABD) kullanılarak toplam RNA çıkarıldı, cDNA'ya ters transkripsiyon yapıldı ve SYBR yeşil içeren bir TM One Step RT PCR kiti (Applied Biosystems, Grand Island, NY, ABD) kullanılarak PCR ile çoğaltıldı. Gerçek zamanlı kantitatif PCR, Applied Biosystems 7500 Gerçek Zamanlı PCR sistemi (Applied Biosystems, Grand Island, NY, ABD) kullanılarak gerçekleştirildi. Primer dizileri ve prob dizisi Tablo'da gösterilmiştir.1Örnek cDNA'ların alikotları ve eşit miktarda GAPDH cDNA'sı, üretici talimatlarına (Applied Biosystems, Foster, CA, ABD) göre DNA polimeraz içeren TaqMan® Universal PCR ana karışımı ile çoğaltıldı. PCR koşulları, 40 döngü boyunca 50°C'de 2 dakika, 94°C'de 10 dakika, 95°C'de 15 saniye ve 60°C'de 1 dakika olarak belirlendi. Hedef genin konsantrasyonu, üretici talimatlarına göre karşılaştırmalı Ct (amplifikasyon grafiği ile eşik değer arasındaki kesişme noktasındaki eşik döngü sayısı) yöntemi kullanılarak belirlendi.
